روند ورود ، پردازش و آزمایش نمونه در آزمایشگاه ویروس شناسی
· ورود نمونه و پذیرش نمونه:
پذیرش و نمونه گیری توسط همکاران در بخش پذیرش آزمایشگاه جهت بیماران سر پائی و یا همکاران پرستاری بیمارستان مستقر در بخش های مختلف بشرح زیرصورت می پذیرد:
o انجام پذیرش در برنامه شبکه مدیریت بیماران
o ردیابی پذیرش توسط پرسنل آزمایشگاه از طریق شبکه مدیریت بیماران
o ورود نمونه از واحد پذیرش سرپائی، آزمایشگاه اورژ‍انس و یا از بخش ها به آزمایشگاه ویروس شناسی
o ثبت نمونه در دفتر ثبت ورود "نمونه" در آزمایشگاه ویروس شناسی
o نگه داری نمونه در یخچال آزمایشگاه ویروس شناسی
· تیمار و پردازش نمونه: نمونه در اتاق پردازش و استخراج اسید نوکلئیک در زیر هود لامینار کلاس 2 پردازش شده و در فریزر 70- درجه سانتیگراد نگهداری می شود.
· استخراج اسید نوکلئیک:استخراج اسید نوکلئیک در زیر هود اختصاصی کلاس 2 در اتاق پردازش و استخراج اسید نوکلئیک صورت پذیرفته و RNAدر فریزر70- درجه سانتیگراد اتاق استخراج اسید نوکلئیک و DNA در فریزر 20- درجه سانتیگراد اتاق PCR نگهداری می شوند.
· انجام آزمایش ملکولار:
o تهیه مستر میکس:این عملیات در اتاق ساخت مستر میکس در زیر Dead air boxصورت می پذیرد.
o اضافه کردن اسید نوکلئیک و انجام PCR:اضافه کردن اسیدنوکلئیک در اتاق PCRدر زیر هود صورت می پذیرد. سپس لوله های واکنش در دستگاه PCRقرار داده و واکنش انجام می شود.
o الکتروفوزر: الکتروفورز در اتاق POST PCRانجام شده و نتایج توسط دستگاه مستندساز دیجیتال ثبت می شود.
لیست آزمایشات مبنی بر نوع نمونه گیری(بخش پذیرش)نوع نمونه و حجم مورد نظر
|
نوع نمونه |
حجم مورد نظر |
|
CBC |
3CCتا 4 |
|
CSF |
حداقل CC1 |
|
ادرار |
CC5 |
|
بال و ترشحات تراشه |
4CCتا 5 |
|
مدفوع |
حجم مناسب |
لیست آزمایشات مبنی بر انجام ازمایش روی نمونه
|
آزمایش درخواست شده |
نوع نمونه |
|
INF A INF B RHINO PARA INFLUENZA RSV ADENO H1N1 CORONA
EBV CMV HSV1 HSV2 VZV BK/JC/SV40 HHV8 ENTERO
EBV CMV HSV1 HSV2 ADENO
B19
HBV HCV HIV
HPV
HTLV1 HTLV2
HSV1 HSV2 BK/JC/SV40 HIV(در بعضی موارد)
ROTA NLV
CMV VL EBV VL
HBV VL HCV VL
|
سواب ته حلق-ترشحات تراشه-بال- خلط-در بعضی از موارد خون
خون کامل – پلاسما
بال – ترشحات تراشه – سواب
پلاسما
بلوک های پارافینه- سواب های واژینال،جنیتال و نمونه های TIN PREP-بال
بافی کوت- PBML
CSF
مدفوع
خون کامل –پلاسما(در صورت درخواست پزشک بال)
پلاسما |
لیست خدمات آزمایشگاهی ارائه شده در آزمایشگاه ویروس شناسی مرکز تحقیقات ویروس شناسی
|
ردیف |
کمی/کیفی |
نوع خدمت آزمایشگاهی |
نوع روش کار |
|
1 |
کیفی |
HSV1 PCR |
CONVENTIONAL PCR-HOME BROW |
|
2 |
کیفی |
HSV2-PCR |
CONVENTIONAL PCR-HOME BROW |
|
3 |
کیفی |
HHV8-PCR |
CONVENTIONAL PCR-HOME BROW |
|
4 |
کیفی |
VZV-PCR |
CONVENTIONAL PCR-HOME BROW |
|
5 |
کیفی |
HIV-RTPCR |
CONVENTIONAL PCR-HOME BROW |
|
6 |
کمی |
HIV-VIRAL LOAD |
کیت تجاری-REAL TIME PCR |
|
7 |
کیفی |
HPV-PCR |
CONVENTIONAL PCR-HOME BROW |
|
8 |
کیفی |
HPV-GENOTYPING |
CONVENTIONAL PCR-HOME BROW |
|
9 |
کیفی |
ADENO-PCR |
CONVENTIONAL PCR-HOME BROW |
|
10 |
کیفی |
HCV-RTPCR |
REAL TIME PCR-HOME BROW |
|
11 |
کمی |
HCV-VIRAL LOAD |
کیت تجاری-REAL TIME PCR |
|
12 |
کیفی |
EBV-PCR |
REAL TIME PCR-HOME BROW |
|
13 |
کیفی |
HBV-PCR |
REAL TIME PCR-HOME BROW |
|
14 |
کمی |
HBV-VIRAL LOAD |
کیت تجاری-REAL TIME PCR |
|
15 |
کیفی |
INFLUENZA A-RTPCR |
REAL TIME PCR-HOME BROW |
|
16 |
کیفی |
INFLUENZ B -RTPCR |
REAL TIME PCR-HOME BROW |
|
17 |
کیفی |
RSV-RTPCR |
REAL TIME PCR-HOME BROW |
|
18 |
کیفی |
PARA INFLUENZA 1/2/3
|
REAL TIME PCR-HOME BROW |
|
19 |
کیفی |
ENTEROVIRUS-RTPCR |
REAL TIME PCR-HOME BROW |
|
20 |
کیفی |
RHINOVIRUS-RTPCR |
REAL TIME PCR-HOME BROW |
|
21 |
کیفی |
BK/JC/SV40 |
CONVENTIONAL PCR-HOME BROW |
|
22 |
کیفی |
HCV GENOTYPING |
کیت تجاریREAL TIME PCR- |
|
23 |
کیفی |
CMV-PCR |
REAL TIME PCR-HOME BROW |
|
24 |
کمی |
CMV-VIRAL LOAD |
کیت تجاریREAL TIME PCR- |
موارد عدم انطباق
- NESTED PCR
A. مواردی که آلودگی درکنترل منفی مشاهده می شود. اقدامات انجام شده شامل آلودگی زدایی از زیر هود و تکرار آزمایش می باشد.
B. مواردی که کنترل مثبت منفی شود. اقدامات انجام شده شامل انتخاب کنترل مثبت جدید و تکرار آزمایش می باشد.
C. مواردی که یکی از دو تکرار در تست منفی و دیگری مثبت باشد. اقدام انجام شده شامل تکرار آزمایش همان نمونه می باشد.
D. مواردی که درخواست HIV دارند (که با دو رقت 1/1 و 10/1 انجام می شود) در صورتی که رقت 1/1 مثبت و رقت 10/1 منفی گزارش شود، اقدام انجام شده شامل تکرار آزمایش همان نمونه با دو رقت 1/1 می باشد.
- REAL TIME PCR
A. مواردی که یکی از دو تکرار در تست منفی و دیگری مثبت باشد. اقدام انجام شده شامل تکرار آزمایش همان نمونه می باشد.
B. مواردی که کنترل مثبت منفی شود و یا کنترل منفی مثبت شود. در حالت اول بعد از بررسی علت با انتخاب کنترل مثبت جدید و یا تهیه ی پرایمر پروب جدید و در حالت دوم بعد از آلودگی زدایی آزمایش تکرار می شود.
C. مواردی که در CTهای خیلی بالا (بین 40 تا 50) و در CTهای خیلی پایین (زیر18) مثبت می شوند. اقدام انجام شده شامل تکرار همان نمونه می باشد.
D. مواردی که گراف های غیر EXPOTENTIALمشاهده شود. اقدام انجام شده شامل تکرار همان نمونه می باشد.
